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            微生物實驗室設計規范與標準

            微生物實驗室是指進行微生物研究的場所。根據微生物實驗室的安全要求和使用要求,要不同于一般的實驗室工程或凈化工程。主要應用于微生物學、生物醫學、生物化學、動物實驗、基因重組以及生物制品等研究使用的實驗室統稱生物安全實驗室。

            微生物實驗室設計規范與標準

            微生物實驗室通常由準備室、滅菌室、無菌室、恒溫培養室和普通實驗室五部分組成。這些房間的共同特點是地板和墻壁的質地光滑堅硬,儀器和設備的陳設簡潔,便于打掃衛生。

            微生物實驗室建設基本要求

            一、準備室
            準備室用于配制培養基和樣品處理等。室內設有試劑柜、存放器具或材料的專柜、實驗臺、電爐、冰箱和上下水道、電源等。準備室還要用于洗刷器皿等。室內應備有加熱器、蒸鍋,洗刷器皿用的盆、桶等,還應有各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。
            二、滅菌室
            滅菌室主要用于培養基的滅菌和各種器具的滅菌,室內應備有高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設備及設施。
            三、無菌室
            無菌室也稱接種室,是系統接種、純化菌種等無菌操作的專用實驗室。在微生物工作中,菌種的接種移植是一項主要操作,這項操作的特點就是要保證菌種純種,防止雜菌的污染。在一般環境的空氣中,由于存在許多塵埃和雜菌,很易造成污染,對接種工作干擾很大。
            1. 無菌室的設置
            無菌室應根據既經濟又科學的原則來設置。其基本要求有以下幾點:
            (1)無菌室應有內、外兩間,內間是無菌室,外間是緩沖室。房間容積不宜過大,以便于空氣滅菌。最小內間面積2×2.5=5m2,外間面積1×2=2m2,高以2.5m以下為宜,都應有天花板。
            (2)內間應當設拉門,以減少空氣的波動,門應設在離工作臺最遠的位置上;外間的門最好也用拉門,要設在距內間最遠的位置上。
            (3)在分隔內間與外間的墻壁或“隔扇”上,應開一個小窗,做接種過程中必要的內外傳遞物品的通道,以減少人員進出內間的次數,降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm,內外都掛對拉的窗扇。
            (4)無菌室容積小而嚴密,使用一段時間后,室內溫度很高,故應設置通氣窗。通氣窗應設在內室進門處的頂棚上(即離工作臺最遠的位置),最好為雙層結構,外層為百葉窗,內層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內室使用后、滅菌前開啟,以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機。
            2. 無菌室內設備和用具
            (1)無菌室內的工作臺,不論是什么材質、用途的,都要求表面光滑和臺面水平。
            (2)在內室和外室各安裝一個紫外燈(多為30W)。內室的紫外線燈應安裝在經常工作的座位正上方,離地面2m,外室的紫外線燈可安裝在外室中央。
            (3)外室應有專用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。
            (4)內室應有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標簽紙、膠水、廢物筐等。
            3. 無菌室的滅菌消毒
            (1)薰蒸:這是無菌室徹底滅菌的措施。無菌室使用了較長時間,污染比較嚴重時,應進行薰蒸滅菌??捎眉兹?、乳酸或硫磺薰蒸。
            (2)噴霧:在每次使用無菌室前進行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降,防止桌面、地面上的微塵飛揚,并有殺菌作用??捎?%石炭酸噴霧。
            (3)紫外線照射:在每次使用無菌室前進行。紫外線有較好的殺菌效果。通常應開啟紫外線燈照射30~60min。
            4. 無菌室工作規程
            (1)無菌室滅菌。每次使用前開啟紫外線燈照射30min以上,或在使用前30min,對內外室用5%石炭酸噴霧。
            (2)用肥皂洗手后,把所需器材搬入外室;在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋,戴好口罩,然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘。
            (3)將各種需用物品搬進內室清點、就位,用5%石炭酸在工作臺面上方和操作員站位空間噴霧,返回外室,5~10min后再進內室工作。
            (4)接種操作前,用70%酒精棉球擦手;進行無菌操作時,動作要輕 緩,盡量減少空氣波動和地面揚塵。
            (5)工作中應注意安全。如遇棉塞著火,用手緊握或用濕布包裹熄滅,切勿用嘴吹,以免擴大燃燒;如遇有菌培養物灑落或打碎有菌容器時,應用浸潤5%石炭酸的抹布包裹后,并用浸潤5%石炭酸的抹布擦拭臺面或地面,用酒精棉球擦手后再繼續操作。
            (6)工作結束,立即將臺面收拾干凈,將不應在無菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無菌室后,對無菌室用5%石炭酸噴霧,或開紫外線燈照射30min。

            微生物實驗室布局設計及規劃

            一、選址:
            1. 實驗室應選擇在清潔安靜的場所,遠離生活區,鍋爐房與交通要道;
            2. 實驗室應選擇在光線充足,通風良好的場所,要與生產加工車間有一定距離;
            3. 實驗室應選擇在方便扦樣與檢驗,距離車間較近的工作場所。
            二、結構和布局:
            根據生產實際需要,一般工廠應設置細菌與理化檢驗兼有的綜合實驗室,主要包括以下三大部分:細菌實驗室、理化實驗室、辦公室。
            1. 辦公室
            2. 理化分析實驗室(或者和細菌檢驗操作室合并)

            ①理化分析室(兼作感觀檢驗室)

            ②儀器室(兼放細菌室顯微鏡等少量儀器)

            3.細菌實驗室

            ①細菌檢驗操作室

            ②無菌室

            ③培養基制作室

            ④洗滌消毒室

            一般布局要求如下:
            1. 辦公室:辦公室是化驗人員進行原始記錄等各項工作的場所,是與非化驗室人員交往較多的場所,因此,應設在整體綜合化驗室的最外層,只需有桌、椅等簡單設施即可。
            2. 細菌檢驗操作室(常規操作)細菌檢驗操作室是細菌培養與檢驗主要操作室,主要設施是實驗臺。
            對實驗臺的要求:

            a.實驗臺面積一般不小于2.4×1.3m;

            b.實驗臺位置應在實驗室中心位置,要有充足光線;也可以做邊臺。

            c.實驗臺兩側安裝小盆與水龍頭;

            d.實驗臺中間設置試劑架,架上裝有日光燈與插座;

            e.實驗臺材料要以耐熱、耐酸堿為宜。

            3. 無菌室:無菌室通過空氣的凈化和空間的消毒為微生物實驗提供一個相對無菌的工作環境,無菌室是處理樣品和接種培養的主要工作間,應與細菌檢驗操作室緊密相連。為滿足無菌室無菌要求,無菌間應滿足以下布局:

            a.入口避開走廊,設在細菌檢驗操作室內;

            b.與操作室用兩道緩沖間隔開;

            c.無菌室與緩沖間均裝有紫外燈,要求每3平米安裝30w紫外燈一盞;

            d.無菌室內設有實驗臺中央臺(實驗臺與邊臺皆可),紫外燈距實驗臺面要小于1.5m;

            e.無菌室與操作室之間設有雙層窗構成小通道。

            4. 培養基制作室:培養基室是制作、配制微生物培養所需培養基及檢驗用試劑的場所,其主要設備應為邊臺與藥品柜。

            a.邊臺上要放置電爐,以滿足熔化煮沸培養基時用;

            b.邊臺材料要耐高熱、耐酸堿;

            c.藥品柜分門別類存放一些一般藥品及試劑;

            d.危險、易腐易燃有毒有害藥品單獨設保險柜存放;

            e.邊臺上要放天平,以稱取藥品用。

            5. 洗滌消毒室:洗滌消毒室用以消毒洗滌待用與已用之玻璃器皿,培養基及污物,其面積應大于10m2 。為滿足洗滌消毒的功能,洗滌消毒室應設有:

            a.1-2個洗滌池,洗滌池上下水網要暢通;

            b.器皿柜或實驗臺,以放置洗滌好器皿;

            c.高壓滅菌鍋,其所用電源應滿足用電負荷;

            d.室內安有通風裝置(通風柜)或換氣扇;

            e.有條件的單位還可在該室內,設供日常檢驗用水蒸餾水器裝置。

            6. 理化分析室:(如果沒有條件,這個可以和微生物常規實驗室合并)理化分析室是物理化學分析的主要操作室

            a.實驗臺與細菌操作室要求相同

            b.設置通風柜以滿足加熱、消化、干燥、燒灼和化學處理等工作需要;

            c.洗滌池。

            7. 儀器室:如果沒有條件,這個可以和微生物常規實驗室合并,用以放置顯微鏡、電子天平及理化分析用小型儀器;

            a.要求清潔干燥、防潮防蟲、避光;

            b.儀器臺要穩固、牢靠。

            對于小型企業實驗室,如果沒有更多的房間進行區分,應該可以通過規劃房間分區,以保證實驗室不同工作區(潔凈區和一般操作區)之間有一定區分,因此,最少應保證4個房間或者4個分區。
            (1)洗刷消毒區域,這個區域要求相對獨立,最好以房間間隔,因為這個區域處理廢物,有一定的污染和濕度;
            (2)培養基配制區域,用于培養基的配制,經常有水等,需要相對獨立一些;
            (3)一般操作區域,這個是主要操作區域,微生物的試驗結果的觀察,顯微鏡操作,一般的簡單理化操作,儀器設備等,都可以合并在這個房間或者區域進行;
            (4)無菌操作區域,無菌間,這個要求獨立。

            一般儀器設備和玻璃儀器配置

            1. 培養箱:主要用于實驗室微生物的培養,為微生物的生長提供一個適宜的環境。
            1)普通培養箱:一般控制的溫度范圍為:室溫+5~65度,又分為電熱恒溫培養箱和隔水式恒溫培養箱。
            2)生化培養箱:一般控制的溫度范圍為:5~50度。
            3)恒溫恒濕箱:一般控制的溫度范圍為:5~50度,控制的濕度范圍為:50~90%??勺鳛槊咕囵B箱。
            4)厭氧培養箱:適用于厭氧微生物的培養。
            2. 電熱干燥箱:用于吸管,平皿類玻璃器皿的干熱、滅菌和烘烤。
            3. 高壓蒸汽滅菌器(又叫高壓滅菌鍋):物品的滅菌。
            4. 冰箱:
            5. 電子天平:一般要求具備精度達到萬分之一的分析天平。
            6. 顯微鏡:觀察細菌形態和動力、微生物和微小物品結構的必備儀器。
            7. 均質器:用于均質樣品,有旋轉刀片式和拍擊式可以選擇。
            8.蒸餾水器:提供蒸餾水
            9.水浴鍋:部分培養溫度需要水?。ㄈ绱竽c桿菌檢驗)
            10.超凈工作臺:超凈工作臺作為代替無菌室的一種設備,使用簡單方便,為實驗地開展提供一個相對無菌的操作臺。
            其它可能用到的設備:高壓鍋、厭氧培養設備、離心機、振蕩器、烤箱、恒溫水浴箱、菌落計數器、電位 pH計、高速離心機等設備。

            常規玻璃器皿

            1. 吸管:用于吸取少量液體,常用的吸管為0.1刻度1mL及1.0刻度的10mL吸管。
            2. 培養皿:為硬質玻璃雙碟,常用于分離培養,蓋與底大小應合適,常用規格為90mm。
            3. 三角燒瓶與廣口瓶:多用于盛培養基及配制溶液,常用的規格有250mL、500mL、1000mL。
            4. 燒杯:供盛液或煮沸用,常用的規格為100mL、250mL、500mL、1000mL
            5. 量筒:用于液體測量,常用規格為100mL、250mL、1000mL
            6. 試管:用于細菌培養,有多種規格。
            7. 載玻片蓋玻片:細菌涂片觀察用。
            8. 試劑瓶:裝試劑用,常用棕色避光
            9.其它,如試管架、毛刷、酒精燈、接種針、接種環等
            化學試劑和培養基化學試劑和培養基:
            參照所執行標準后面附錄購買所需試劑和培養基,目前所用多為合成干粉培養基,試劑也可以購買到標準配套試劑。
            綜上所述,微生物實驗室的布局、設計和建造應有利于避免交叉污染、便于清潔及日常維護, 以保證高潔凈度的無菌實驗環境;其次,人和物是潔凈區的主要污染源。因此,必須對系統的操作人員進行培訓,讓其充分掌握系統的運行要求,使實驗用品、人帶來的污染得到有效控制。在人、物流的設計和管理上,基本原則是不經過凈化處理的人、不經消毒滅菌的物品不能進入無菌區域。關于微生物實驗室規劃設計,不同行業需要考慮的具體事情都不太一樣,切記要針對自身實驗室需求規劃,另外,預算資金也是一個考慮要點。

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